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    基于維生素D作用途徑探討靜寧顆粒治療ADHD的療效及機制研究

    鄧家琳  
    【摘要】:研究目的本研究分為臨床研究和實驗研究兩部分,旨在進一步驗證靜寧顆粒治療ADHD氣陰兩虛型患兒臨床療效的基礎之上,探索其在維生素D作用途徑上的相關機制及對負性情緒的調控作用,并發掘靜寧顆粒治療ADHD模型大鼠可能涉及的其他途徑和作用機制,以期為靜寧顆粒治療該病提供更多的數據和理論支持。臨床研究方面,通過觀察靜寧顆粒治療ADHD氣陰兩虛型患兒前后疾病療效、各量表評分及相關血清指標的變化,評價靜寧顆粒治療ADHD的臨床療效,觀察靜寧顆粒對ADHD相關負性情緒的調控作用及對維生素D作用途徑相關指標的改善情況,為靜寧顆粒進一步開展新藥研發及推廣提供重要臨床依據。實驗研究方面,通過采用曠場實驗檢測ADHD模型大鼠的行為學及負性情緒改善情況,同時觀察靜寧顆粒對ADHD模型大鼠維生素D作用途徑上部分指標的表達情況及含量改善水平,驗證靜寧顆粒作用于多巴胺能系統可能是通過調節該途徑相關因子這一假說,為靜寧顆粒進一步開展新藥研發及臨床推廣提供重要實驗依據。研究方法臨床研究方面,納入符合標準的ADHD患兒25例,給予靜寧顆??诜?療程8周,期間記錄患兒一般資料,并在治療0周、4周、8周時間節點進行SNAP-Ⅳ量表積分、Conners父母問卷評分、劃消試驗評分以及中醫證候量表評分的記錄。治療0周、8周節點時進行血清維生素D、DA、TH、BDNF含量檢測,同時進行安全性評價,觀察靜寧顆粒治療ADHD的臨床療效和對上述檢測指標的改善情況。實驗研究方面,將雄性4周齡SHR大鼠50只按隨機數字表法分為5組,分別為靜寧顆粒高劑量組、靜寧顆粒中劑量組、靜寧顆粒低劑量組、鹽酸托莫西汀組、模型組,每組10只,同時將雄性4周齡Wistar大鼠10只設為正常對照組。根據組別不同,分別予靜寧顆粒高、中、低劑量混懸液,鹽酸托莫西汀混懸液,去離子水灌胃給藥,每日1次,連續6周。進行曠場行為學實驗,結束后取腦組織樣本檢測下丘腦TH蛋白及TH mRNA表達、紋狀體DAT蛋白及DAT mRNA表達、海馬BDNF蛋白及BDNF mRNA、海馬GABA含量及GAT表達,血清樣本留存檢測維生素D、TH含量,觀察靜寧顆粒對ADHD模型大鼠的行為學改變和對上述檢測指標的改善情況。研究結果臨床研究結果表明,與治療0周相比,治療4周、治療8周時劃消測試結果、SNAP-Ⅳ量表評分結果均有改善;與治療4周相比,治療8周時劃消測試結果、SNAP-Ⅳ量表評分結果明顯改善。與治療0周相比,治療4周、治療8周時Conners父母量表評分中品行問題、學習問題、身心障礙、沖動多動、焦慮、多動指數評分均下降明顯;與治療4周相比,治療8周時各因子評分明顯下降。與治療0周相比,治療4周、治療8周時中醫證候積分量表各主證評分均有改善;與治療4周相比,治療8周時各項評分明顯改善。與治療0周相比,除面色、大便外,治療4周時中醫證候積分量表次證其余各項均有所改善,治療8周時各項均明顯改善;與治療4周相比,治療8周時除面色、大便外的各項次證均明顯改善。治療前后疾病療效總有效率為84%,中醫證候療效總有效率為84%。與治療0周相比,治療8周時血清維生素D、DA、BDNF含量明顯升高,TH含量沒有明顯差異。實驗研究結果表明,曠場實驗中,與模型組相比較,靜寧顆粒高、中、低劑量各組及托莫西汀組運動總路程、中心路程和中心時間明顯減少,靜止時間和邊緣時間明顯增加,其中以靜寧顆粒高劑量組與鹽酸托莫西汀組改善最為明顯。靜寧顆粒高劑量組、鹽酸托莫西汀組均能顯著上調ADHD模型大鼠血清TH含量;靜寧顆粒各劑量組、鹽酸托莫西汀組均能顯著上調ADHD模型大鼠血清維生素D含量。靜寧顆粒高劑量組、鹽酸托莫西汀組均能顯著上調ADHD模型大鼠下丘腦TH蛋白及TH mRNA表達水平;靜寧顆粒高、中劑量組和鹽酸托莫西汀組均能顯著下調ADHD模型大鼠紋狀體DAT蛋白及DAT mRNA表達水平;靜寧顆粒高劑量組、鹽酸托莫西汀組均能顯著上調ADHD模型大鼠海馬BDNF蛋白及BDNF mRNA表達水平;靜寧顆粒各劑量組、鹽酸托莫西汀組均能顯著上調ADHD模型大鼠海馬GABA含量及GAT表達水平。研究結論臨床研究方面,靜寧顆粒能夠改善氣陰兩虛型ADHD患兒臨床核心癥狀和中醫證候表現,且對相關負性情緒存在一定調節作用;ADHD患兒存在多巴胺能系統異常,靜寧顆粒能夠改善其失調狀態,這可能是通過對維生素D作用途徑相關因子TH、BDNF等的調控發揮作用的。實驗研究方面,靜寧顆粒能夠有效控制ADHD模型大鼠的多動沖動行為,調控相關負性情緒,其療效與鹽酸托莫西汀相當;ADHD模型大鼠存在多巴胺能系統代謝異常,靜寧顆??梢酝ㄟ^調節維生素D作用途徑,對通路上TH、DAT、BDNF等相關因子的蛋白及基因表達進行調控,改善腦內多巴胺能系統的失調狀態,從而發揮療效。


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